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thermofisher赛默飞qubitflex荧光分光光度计仪器标准品错误
2026-07-21 09:25:31 作者: 高思维医疗 681

“Qubit Flex 仪器标准品错误”这个提示,通常表明仪器在校准过程中,检测到的标准品荧光信号不在预期范围内。

不用太担心,这不是仪器坏了,绝大多数情况都可以通过以下步骤来排查和解决。


一、检查关键数值与硬件

1、查看原始荧光值 (RFU):在仪器上找到“Check Standards”或“Check Calibration”功能。

(1)对于核酸定量:标准品2 (Standard 2) 的荧光值,应至少是标准品1 (Standard 1) 的 10到50倍。

(2)对于蛋白定量:标准品3 (Standard 3) 的荧光值应约为标准品2 (Standard 2) 的 2倍。

(3)如果荧光值不满足上述关系,说明标准品本身或配制过程可能有问题。

2、检查仪器光源:打开仪器盖子,运行一次校准,观察样品槽内是否有红光或蓝光闪烁5次。如果没有,说明仪器光路可能存在问题,需要联系售后。


二、检查操作流程

1、确认标准品与样本的配制:检查是否严格按照说明书操作。例如,标准品通常需要将 10 µL 的标准品加入到 190 µL 的工作溶液中。同时,请确保标准品与样品使用的是同一批工作液。

2、核对试剂盒与程序:确认仪器上选择的程序与你所用的Qubit检测试剂盒匹配。

3、检查标准品与试剂盒有效期:Qubit试剂盒自收到之日起,通常稳定至少6个月。如果试剂盒已过期(比如超过一年),或怀疑RNA标准品降解,建议更换新的试剂盒。

4、检查检测管:确保使用的是光学透明的专用检测管。同时,保证管外壁清洁干燥,且管内液体体积至少为200 µL。


三、排查环境与操作细节

1、温度控制:Qubit检测对温度。确保所有试剂(缓冲液、染料)和样本都处于室温(~25°C)。刚从4°C冰箱取出的缓冲液,即使在室温放置2-3小时也可能仍未达到室温。

2、避免样本过热:刚从离心机取出的样本,或在仪器内放置过久、反复读取的样本,都可能因温度升高导致信号减弱。如需多次读取,应将检测管取出,在室温下平衡至少30秒再测。

3、检查样本浓度:查看原始荧光值,确认样本的荧光值是否落在标准品的荧光值之间(或略高于Z高标准品)。如果不在范围内,仪器会提示“OUT OF RANGE”,此时需要对样本进行稀释或调整上样体积。

4、交叉污染:Qubit检测非常灵敏,即使是上一个样本的微小残留都可能导致错误。建议每次使用新的检测管,并确保管外壁清洁干燥。

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