Qubit 4.0荧光计在检测核酸（DNA/RNA）浓度时，通常比传统的紫外吸收法（如NanoDrop）更灵敏、更特异，尤其在低浓度样本或复杂样品中优势明显。以下是具体对比：

一、灵敏度对比

1、Qubit 4.0

检测下限 ：DNA/RNA：低至 0.5 pg/μL（高灵敏度）

线性范围 ：较窄（适合精准定量低浓度样本）

样本体积 ：仅需 1-20 μL

2、紫外吸收法（NanoDrop等）

检测下限 ：通常 2-5 ng/μL（依赖样品纯度）

线性范围 ：较宽（可测高浓度样本，但低端不准）

样本体积 ：需 1-2 μL（但易受污染物干扰）

二、特异性对比

1、Qubit 4.0：

基于荧光染料（如dsDNA BR Assay），特异性结合目标分子（如双链DNA、单链DNA或RNA），几乎不受游离核苷酸、蛋白质、盐类等干扰。

适合：痕量样本（如单细胞测序、cfDNA）、污染物多的样本（如粗提物）。

2、紫外吸收法：

通过A260吸光度计算浓度，但会受杂质干扰（如蛋白质A280、酚类A270、胍盐等），导致假性偏高。

适合：快速估算高纯度样本（如柱提后的DNA/RNA）。

三、适用场景

1、优先选择Qubit 4.0：

需要高精度（如NGS文库定量）。

样本浓度极低（如环境DNA、微量提取物）。

样本含污染物（如胍盐、酚、蛋白质）。

2、紫外吸收法的优势：

快速检测（无需染料孵育）。

可同时评估纯度（A260/A280、A260/A230比值）。

四、注意事项

1、Qubit的局限性：

需使用特定荧光染料（成本较高）。

每次检测需标准品校准。

无法区分DNA和RNA（除非使用RNA特异性染料）。

2、紫外吸收法的风险：

污染物可能导致浓度虚高（如盐离子也会吸收260 nm光）。

五、总结

1、灵敏度：Qubit 4.0显著优于紫外法，尤其对低浓度样本（＜10 ng/μL）。

2、准确性：Qubit受干扰更少，结果更可靠。

3、效率：紫外法更快，适合初步筛查。