这是一款现代实验室中用于快速、微量检测核酸、蛋白质等样品浓度和纯度的精密仪器。它与传统分光光度计的核心区别在于 “超微量”——所需的样品体积非常小。

一、核心定义

超微量分光光度计是一种利用紫外-可见光吸收原理，对极微量液体样品（通常为0.5 - 2 μL）进行吸光度检测，从而分析物质浓度、纯度和结构的仪器。

其工作原理遵循朗伯-比尔定律：物质在一定波长下的吸光度（A）与其浓度（c）和光程（l）成正比。

公式为： A = ε c l

其中，ε 是摩尔吸光系数，是物质的特性常数。

为了适应极微小的样品量，它没有比色皿，而是使用了特殊的样品保留系统（如基座和纤维臂），形成一道微小的液柱，并通过极短的光程（通常为0.2mm或更短）来进行测量，从而避免了样品稀释，并实现了高灵敏度检测。

二、核心应用领域

1、超微量分光光度计是分子生物学、生物化学、细胞生物学等领域不可或缺的工具。

核酸定量分析：

DNA/RNA浓度：通过测量260 nm波长处的吸光度（A260）来计算浓度。

样品纯度评估：

A260/A280比值：判断核酸中蛋白质污染（纯DNA~1.8， 纯RNA~2.0）。

A260/A230比值：判断盐类、胍盐、酚类等有机溶剂的污染。

2、蛋白质定量分析：

通过特定的显色方法（如Bradford法、BCA法）在特定波长（如595nm或562nm）下测量吸光度来定量蛋白质浓度。

3、其他应用：

荧光染料标记样品的检测。

微阵列样品质量控制。

细胞培养液浓度测量。

三、优点与局限性

1、优点：

节省样品：对于珍贵或难以获得的样品（如古代DNA、微量提取物、NGS文库）是理想选择。

快速高效：无需稀释，无需清洗比色皿，可高通量检测多个样品。

操作简便：一键操作，自动化程度高。

样品可回收：检测后样品未被稀释或污染，可以回收用于下游实验。

2、局限性：

检测范围：由于光程极短，高浓度样品可能无需稀释，但低浓度样品的检测灵敏度可能不如传统10mm光程的仪器。

精度：对加样操作的技巧有一定要求，气泡或加样量不准会影响结果。

成本：仪器本身通常比传统分光光度计昂贵。

3、总结

超微量分光光度计是一款为现代微量生命科学研究量身定制的分析设备。它通过革新的光学设计（极短光程）和加样方式（无池检测），完美解决了传统方法在检测微量样品时面临的样品量不足、操作繁琐、需要稀释等痛点，已成为分子生物学实验室的质量控制中心。