赛默飞（Thermo Fisher Scientific）的超微量分光光度计（Z常见的是 NanoDrop™ One/OneC 或 NanoDrop™ Eight 系列）的操作流程非常直观和简洁。以下是详细的实验操作流程，以Z经典的NanoDrop One检测双链DNA（dsDNA）样本为例。其他类型样本（如RNA、蛋白质）的流程基本相同，主要在软件设置上选择不同的检测模式。

一、赛默飞超微量光度计实验前准备

1、开机与初始化：

打开主机电源。

启动电脑上的 NanoDrop™ 软件。软件会自动识别仪器并进行自检（活塞升降、光源检测等），等待软件主界面出现。

2、清洁上下测量基座（Z关键步骤！）：

取一张无屑的精细擦拭纸（如Kimwipe）。

滴加 2-3 μL 超纯水 在下测量基座上。

轻轻合上上臂，让上下基座通过水膜接触，然后迅速抬起上臂。

用另一张干净的擦拭纸彻底擦干上下基座表面，确保无任何水渍、指纹或样品残留。

警告：任何残留都会导致测量结果严重不准！

3、准备空白对照（Blank）与待测样本：

准备用于溶解样本的缓冲液（如TE buffer、无菌水）作为空白液。

将待测样本短暂离心，使管壁上的液滴集中到管底。

根据需要，将样本进行适当稀释（通常使测量值落在仪器线性范围内Z佳）。

二、赛默飞超微量光度计实验测量步骤

1、选择检测模式：

在软件主界面选择您要测量的样本类型，例如：核酸 (Nucleic Acid) -> DNA-50 (表示dsDNA模式)。

2、进行空白校正（Blank）：

在下方基座上滴加 1-2 μL 空白溶液（如TE buffer）。

放下仪器上臂，使上下基座通过液柱连接。

点击软件上的 “空白” (Blank) 按钮。

校正完成后，抬起上臂，用擦拭纸彻底清洁上下基座（方法同前）。

3、测量样品：

在清洁后的下基座上滴加 1-2 μL 待测样本。

注意：样本量不宜过多或过少，1-2 μL足以形成稳定的液柱。

放下仪器上臂。

点击软件上的 “测量” (Measure) 按钮。仪器会立即显示测量结果。

4、记录数据与清洁：

记录或直接保存数据。

抬起上臂，立即彻底清洁上下基座，防止样本干燥残留。

重复步骤3和4，测量下一个样本。

三、实验后操作

完成测量：

1、测量完所有样本后，在基座上滴加超纯水，进行Z后一次清洁和擦拭。

确保基座完全干燥、洁净。

2、关闭软件和仪器：

退出NanoDrop软件。

关闭仪器主机电源。

四、注意事项与常见问题

1、清洁是关键！ 每次测量后必须彻底清洁，这是保证数据准确性的Z重要前提。残留的样本是Z大的误差来源。

2、样本量：1-2 μL即可，无需过多。液柱能稳定形成即可。

3、气泡：加样时尽量避免产生气泡，气泡会散射光线，影响结果。

4、样本纯度：

A260/A280：纯DNA约为1.8，纯RNA约为2.0。比值过低可能表示有蛋白质污染。

A260/A230：应大于2.0。比值过低可能表示有盐类或有机溶剂（如胍盐、酚、乙醇等）污染。

5、浓度范围：虽然NanoDrop的线性范围很宽，但对于浓度极高（光谱曲线出现平头峰）或极低的样本，建议进行适当稀释后再测，结果更为可靠。

6、对于NanoDrop Eight（8联机）：操作原理完全相同，只是有8个通道。需要确保每个通道的检测基座都清洁干净，并且空白校正和样本加载对应到同一个通道。