QuantStudio 1是一个经典的入门级qPCR仪，使用96孔板进行实验。其所需的耗材和试剂可以分为两大类：仪器专用耗材和通用试剂。

一、赛默飞QuantStudio1实时荧光定量PCR核心耗材

1、反应板 / 板子

（1）微孔板： Z常用的是标准96孔PCR板。重要的是，板子的材质必须是光学级的，以确保荧光信号能被仪器准确检测。

（2）推荐品牌： 首选当然是赛默飞原厂的MicroAmp™ Fast 96孔反应板（货号例如：4346906），因为它与仪器的兼容性和光学性能都经过优化。

（3）兼容品牌： 其他知名品牌（如 Axygen, Bio-Rad, Eppendorf 等）生产的标准96孔光学PCR板通常也可以使用，但建议先进行验证以确保实验结果稳定。

2、光学盖膜或盖板

这是密封反应板、防止样品蒸发和污染的关键部件。QuantStudio 1系统主要支持两种方式：

（1）光学粘合膜： 这是一次性的透明粘性薄膜，直接贴在反应板上。

（2）推荐： 赛默飞MicroAmp™ 光学粘合膜（货号：4311971）。这是Z常用、Z方便的选择。

（3）光学盖板： 这是一个可重复使用的硬质透明盖板。使用时需要在盖板和反应板之间加一层垫圈以确保密封。

（4）推荐： 赛默飞MicroAmp™ 光学8联管盖（适用于8联管）或相应的96孔光学盖板。可重复使用，长期成本可能更低，但需要清洗和小心维护。

总结： Z基本的耗材组合是 “96孔光学PCR板 + 光学粘合膜”。

二、赛默飞QuantStudo1实时荧光定量PCR核心试剂

1、荧光定量PCR预混液

这是核心试剂，包含了DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等。根据检测方法不同，主要分为两大类：

（1）染料法（SYBR Green）：

原理： 使用SYBR Green染料，它能非特异性地嵌入所有双链DNA中发出荧光。

优点： 便宜，使用灵活。

缺点： 特异性相对较低，会与非特异性产物结合，需要配合熔解曲线分析来验证结果。

推荐试剂： 赛默飞 PowerUp™ SYBR™ Green预混液（货号：A25742）或其经典的 SYBR™ Select Master Mix。其他品牌的SYBR Green预混液也广泛适用。

（2）探针法（TaqMan）：

原理： 使用序列特异性的寡核苷酸探针，探针上带有荧光报告基团和淬灭基团，特异性极高。

优点： 特异性极高，适合多靶标检测（多重PCR）。

缺点： 成本较高，探针需要单独设计合成。

推荐试剂： 赛默飞 TaqMan™ Fast Advanced预混液（货号4444557）或其他 TaqMan™ Universal Master Mix。

2、引物和探针

（1）引物： 无论是染料法还是探针法，都需要一对特异性引物来扩增目标基因。

（2）探针： 仅用于探针法，需要根据目标序列设计并标记好荧光基团（如FAM, VIC等）。

3、模板DNA/cDNA

您要检测的样品核酸。如果是检测RNA，则需要先通过反转录反应将RNA逆转录成cDNA，然后再进行qPCR。

三、标准工作流程总结

1、实验设计： 确定使用染料法还是探针法。

2、配制预混液： 在无菌环境下，将预混液、引物/探针、水混合。

3、分装： 将预混液分装到96孔光学板或8联管中。

4、加入模板： 加入您的DNA/cDNA模板。

5、密封： 贴上光学粘合膜或盖上光学盖板。

6、离心： 短暂离心，去除气泡。

7、上机运行： 将反应板放入QuantStudio 1仪器中，设置好反应程序（退火、延伸温度和时间等）和荧光检测通道，开始运行。

8、数据分析： 运行结束后，使用配套的QuantStudio Design & Analysis Software软件进行数据分析（Ct值计算、标准曲线制作等）。