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2025-11-26 09:13:28
作者: 高思维医疗
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伯乐(Bio-Rad)的CFX Opus Deepwell实时荧光定量PCR系统是一款高性能、高通量的96孔深孔板qPCR仪。要让它顺利运行,您需要搭配以下几类试剂和耗材:
一、伯乐CFX Opus Deepwell实时荧光定量PCR核心试剂:qPCR预混试剂
这是进行实验Z关键的化学物质,通常包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等。您需要根据实验类型选择:
1、探针法预混液:
特点:特异性Z高,适合多重检测。需要设计并合成荧光标记的探针(如TaqMan探针)。
伯乐推荐:SsoAdvanced™ Universal Probes Supermix
其他通用品牌:TaKaRa、Thermo Fisher、Qiagen等公司的探针法预混液也完全兼容。
2、染料法预混液:
特点:成本较低,使用方便,无需设计探针。染料(如SYBR Green I)会与所有双链DNA结合发出荧光。
伯乐推荐:SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix
其他通用品牌:同样,市面上主流的SYBR Green预混液基本都可以在该仪器上使用。
3、一步法RT-qPCR预混液:
特点:如果您是从RNA直接进行定量PCR,需要这种试剂。它将逆转录和qPCR反应整合在同一个管中进行。
伯乐推荐:iScript? One-Step RT-PCR Kit with SYBR? Green 或 iTaq? Universal Probes One-Step Kit
选择建议:伯乐自家的预混液经过优化,兼容性Z好,但仪器也完全开放,支持第三方试剂。您可以根据实验的灵敏度、特异性要求和预算进行选择。
二、伯乐CFX Opus Deepwell实时荧光定量PCR核心耗材
这部分是直接与仪器和样品接触的物理组件。
1、qPCR板:
类型:必须使用96孔深孔板。CFX Opus Deepwell型号的加热块是为深孔板设计的,与标准板不兼容。
规格:常见的容积有0.2 mL。
材质:推荐使用聚丙烯材质的硬板,光学性能好,导热均匀。
封膜:板子需要配合专用的封板膜使用。
2、封板膜:
光学透明封板膜:这是Z常用的类型,必须确保其光学性能优异,不会在qPCR的荧光通道产生自发荧光。
伯乐推荐:Microseal ‘B’ Seal, 光学透明封板膜。这是伯乐仪器的标准配置,兼容性Z佳。
其他品牌:其他公司生产的适用于96孔深孔板的光学透明封板膜也可以使用,但务必确认其光学性能和粘合性。
三、辅助耗材与工具
1、八联管和管盖:
如果您不想使用整板,也可以使用独立的0.2 mL 八联管及对应的平盖或凸盖。同样需要确保是深孔规格。
使用八联管时,需要将它们正确地放置在仪器的96孔板架上。
2、移液器及吸头:
移液器:需要覆盖从微升级到毫升级的精确移液。
带滤芯的吸头:强烈推荐使用,尤其是在处理RNA或进行高灵敏度实验时,可以防止气溶胶污染和交叉污染。
多通道移液器:可以大大提高在96孔板中加样的效率。
四、总结
1、qPCR预混液
推荐品牌/型号:Bio-Rad: SsoAdvanced™ 系列 根据探针法/染料法选择。其他: TaKaRa, Thermo Fisher, Qiagen等。
2、一步法RT-qPCR试剂
Bio-Rad: iScript™ 或 iTaq™ One-Step系列,用于RNA模板。
3、96孔深孔板
Bio-Rad: Hard-Shell? 96-Well PCR Plates (深孔),必须是深孔板
。
4、光学透明封板膜
Bio-Rad: Microseal ‘B’ Seal,密封性好,无荧光干扰。
5、八联管及管盖
Bio-Rad或其他品牌的0.2 mL深孔八联管,可选,用于非整板实验。