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伯乐CFX Opus96实时荧光定量PCR仪实验中需要使用到的耗材和试剂
2025-11-28 09:24:54 作者: 高思维医疗 582

伯乐Bio-Rad CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪实验所需的耗材和试剂。这台仪器是qPCR实验的核心设备,要完成一个完整的实验,需要以下一系列的耗材和试剂。我们可以将其分为三大部分:核心耗材、实验试剂、辅助耗材。


一、伯乐CFX OPUS96实时荧光定量PCR仪核心耗材

这些是直接用于仪器运行和信号检测的消耗品。

1、qPCR反应板/八联管

(1)96孔光学反应板:这是Z常用的耗材,专为CFX Opus 96的光学系统设计。板子必须是光学平盖或使用光学封板膜,以确保激光能准确激发荧光并接收信号。

(2)透明封板膜:用于密封96孔板,防止实验过程中液体蒸发和交叉污染。务必选择与您的仪器兼容的高质量封板膜。

(3)八联管与管盖:如果您不想使用整块板,也可以使用独立的八联管和相应的透明管盖。这对于优化反应条件或样本量少时非常方便。

重要提示:伯乐仪器对耗材有优化建议。使用伯乐原厂或推荐品牌的耗材可以获得Z佳的光学性能和热传导效率。

2、校准板

CFX Opus 96通常需要一块光学校准板。这台仪器在出厂时已校准,但根据实验室标准操作程序,可能需要定期或在移动仪器后进行校准。请参考仪器手册确认您是否需要以及何时需要使用。


二、伯乐CFX OPUS96实时荧光定量PCR仪实验试剂

这些是进行qPCR化学反应所必需的生化成分。

1、PCR预混液

这是核心试剂,通常以2x浓度的形式提供,包含了进行高效、特异性PCR扩增所需的所有成分(除了引物、探针和模板DNA/cDNA)。

(1)主要成分包括:

热启动DNA聚合酶:提高反应特异性和灵敏度。

dNTPs:合成DNA的原料。

MgCl₂:聚合酶必需的辅因子。

缓冲盐:提供Z佳的反应pH环境。

稳定剂和增强剂。

(2)选择类型:

SYBR Green预混液:适用于使用SYBR Green染料法进行实验。染料会嵌入所有双链DNA中发出荧光。

TaqMan探针预混液:适用于使用水解探针法(如TaqMan)进行实验。这种预混液针对探针法的5‘-3’外切酶活性进行了优化。

2、物和探针

(1)引物:一对特异性引物,用于扩增您的目标基因。

对于SYBR Green法,只需要一对引物。对于TaqMan探针法,除了引物,还需要一条荧光标记的探针。

(2)探针:通常是两端分别标记有报告荧光基团和淬灭基团的寡核苷酸探针。

3、模板核酸

(1)DNA:用于基因分型或病原体检测。

(2)cDNA:由RNA经过逆转录 反应合成,用于基因表达分析。

4、无核酸酶水

用于稀释和配制反应体系,确保不会引入外源核酸酶降解您的试剂和样本。

5、阳性对照和阴性对照

(1)阳性对照:含有已知目标序列的模板,用于验证整个实验体系的有效性。

(2)无模板对照:用水代替模板,用于检测试剂或环境中是否存在污染。

6、标准品

如果您需要进行绝对定量,则需要一系列已知浓度的标准品(例如,含有目标基因的质粒DNA或合成寡核苷酸梯度稀释液),用于制作标准曲线。


三、辅助耗材与工具

这些是实验准备过程中必不可少的物品。

1、移液器和无菌带滤芯吸头:用于精确移取液体,带滤芯的吸头可以防止气溶胶污染和交叉污染。

2、涡旋混合仪和微型离心机:用于混匀试剂和离心收集管壁上的液滴。

3、冰盒:用于在准备反应时保持试剂的低温状态。

4、无尘纸/酒精:用于清洁工作台面,防止污染。

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