伯乐CFX Opus 96进行实时荧光定量PCR实验，所需的试剂和耗材可以系统地分为以下几大类：

一、伯乐CFX Opus96实时荧光定量PCR系统核心反应试剂

1、qPCR预混液（Master Mix）

（1）种类：根据检测方法选择。

（2）染料法：如SYBR Green qPCR Master Mix（含有SYBR Green I染料、Hot-Start DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等）。伯乐也推荐使用其自家的SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix，其性能与CFX系列仪器经过优化匹配。

（3）探针法：如TaqMan探针法专用的Master Mix。伯乐对应的产品是SsoAdvanced Universal Probes Supermix。

关键点：务必确认预混液是否包含ROX等被动参考染料。CFX Opus 96等伯乐仪器不需要添加ROX进行孔间信号校正，因此应选择不含ROX或“For ROX-free instruments”的预混液。

2、引物与探针

（1）染料法：需要特异性上游和下游引物。

（2）探针法：需要特异性上游和下游引物以及标记了荧光报告基团和淬灭基团的寡核苷酸探针（如TaqMan探针）。

3、模板DNA/cDNA

纯化好的基因组DNA、逆转录得到的cDNA或质粒DNA等。

4、Nuclease-Free Water

无核酸酶水，用于稀释和调整反应体系体积。

二、伯乐CFX Opus96实时荧光定量PCR系统耗材类

1、qPCR反应板/八联管

（1）96孔反应板：Z常用。必须使用光学级透明的qPCR专用板，确保透光性和热传导性。板有平盖和凸盖之分，需根据仪器配备的加热盖压力模式选择（CFX Opus 96通常使用平盖）。

（2）八联管：灵活性高，适合样本量少的实验。同样需使用光学级透明管和对应的平盖/圆盖。

（3）提示：强烈建议使用伯乐原装或认证兼容的耗材（如Hard-Shell® 96孔板），以获得Z佳的光学性能和热循环一致性。

2、光学密封膜

用于密封96孔板，防止蒸发和污染。必须是光学透明的密封膜，且能与孔板牢固粘合，在热循环过程中不起皱、不翘边。微孔板封板膜或光学封板膜是标准选择。

三、伯乐CFX Opus96实时荧光定量PCR系统辅助试剂与耗材

1、RNA提取试剂（如需从RNA开始）：如TRIzol、柱式提取试剂盒等。

2、逆转录试剂（如需做RT-qPCR）：包含逆转录酶、随机引物/oligo dT、dNTPs、RNase抑制剂等的试剂盒。

3、稀释液：用于标准品梯度稀释，通常可用TE缓冲液或nuclease-free water。

4、实验室通用耗材：

无菌、无核酸酶离心管（0.2mL PCR管，1.5mL，2.0mL）

带滤芯枪头（防止气溶胶污染，规格如10μL， 200μL， 1000μL）

微型离心机

涡旋振荡器

冰盒

四、质量控制与标准品

1、阳性对照：已知含有目标序列的模板。

2、阴性对照：

无模板对照：用水代替模板，监测体系污染。

无逆转录对照：用于RT-qPCR，监测基因组DNA污染。

3、标准品：用于制作标准曲线、定量分析。通常是已知浓度的梯度稀释模板（质粒、PCR产物、合成寡核苷酸等）。