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2025-12-11 09:37:36
作者: 高思维医疗
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艾本德 Eppendorf 5702 R 是一款非常经典和可靠的冷冻型微量台式高速离心机。它在分子生物学、细胞生物学、生物化学等实验室中应用极为广泛。以下将通过几个典型的使用案例来详细介绍其操作流程、关键技巧和注意事项,帮助您更直观地掌握其应用。
一、艾本德5702R冷冻离心机乙醇沉淀后DNA/RNA的回收(Z常用场景)
1、准备工作:
将需要离心的 1.5 mL 或 2.0 mL 微量离心管(内含核酸与醇的混合液)在室温平衡片刻,以减少温差。
确保离心机已接通电源,制冷系统已开启(建议提前15分钟开机预冷)。
准备适配的转子:例如 FA-45-30-11 转子(用于 2.0/1.5 mL 管,Z大 15,000 rpm)。
2、操作流程:
打开盖子: 按下正面按钮打开离心机门。
(1)放置转子与平衡:
检查转子是否已稳妥安装在电机轴上。
严格进行配平! 将含有样品的管子对称放置。如果样品数是单数,必须用一管装有等体积水或缓冲液的管子作为平衡管。
确保所有管盖完全盖紧,并且管盖方向一致(建议管盖朝外朝向转子中心,以免高速旋转时盖子意外弹开)。
(2)参数设置:
关闭机盖。
在控制面板上设置:
温度: +4°C。低温有助于沉淀完全,并防止核酸降解(尤其是RNA)。
转速/离心力: ≥ 12,000 rpm 或 ≥ 12,000 xg。
时间: 15-30分钟。
按下 “Start” 键。仪器会先加速至设定转速,并保持温度。
(3)运行结束
运行结束后会发出蜂鸣声,转子缓慢停止。
等待转子完全停止后,再按下开门键打开机盖。
小心取出样品管,轻轻倒掉上清(管底的白色沉淀即为核酸沉淀)。
进行后续的70%乙醇洗涤和干燥步骤。
二、艾本德5702R冷冻离心机快速收集细胞或细菌沉淀
实验目的: 将液体培养基中的哺乳动物细胞或细菌通过离心快速收集到管底。
1、准备工作:
样品为装有细胞悬液的 1.5 mL 离心管。
转子同上。
2、操作流程:
平衡并装载样品管。
参数设置:
温度: +4°C(保持细胞活性,防止蛋白降解)或 室温(对于细菌)。
转速/离心力: 根据样本类型设定。
真核细胞: 通常 300 - 500 xg, 5-10分钟。避免高速破坏细胞。
大肠杆菌等细菌: 8,000 - 12,000 xg, 1-2分钟。
启动离心。
结束后,可见管底有清晰的细胞/细菌沉淀块,小心吸弃上清。
三、艾本德5702R冷冻离心机小体积样品的“瞬离”
实验目的: 将PCR管壁或管盖上的液体甩至管底,或使反应体系混合均匀。
1、准备工作:
使用 PCR 条管或单个 0.2 mL PCR 管。
更换适配的转子:例如 A-2-DWP 转子(用于 PCR 排管)或带有适配器的转子。
2、操作流程:
将PCR管放入适配器中并对称平衡。
参数设置:
温度: 通常设为 室温 或直接使用 “Short Spin” 功能(瞬离按钮)。
转速/离心力: 6,000 - 10,000 rpm。
时间: 10 - 30秒。时间极短,因此无需开启制冷(制冷系统来不及响应)。
按下“Start”键,瞬间完成。
立即取出使用。
四、艾本德5702R冷冻离心机在不同温度下进行蛋白沉淀
实验目的: 使用TCA/丙酮等方法沉淀蛋白质。
1、准备工作:
样品为蛋白溶液与沉淀剂的混合液。
根据实验方案要求,可能需要室温或低温沉淀。
2、操作流程:
装载并平衡样品。
参数设置:
方案一(低温沉淀): 温度设为 +4°C, 转速 14,000 - 15,000 xg, 时间 15-20分钟。可提高沉淀效率,减少蛋白降解。
方案二(室温沉淀): 温度设为 +20°C 或关闭制冷,其他参数类似。
结束后,小心移除上清,收集蛋白沉淀。
总结: Eppendorf 5702 R是一款精密仪器,其核心在于 “平衡、合适的转子、正确的温控和离心参数” 。通过上述案例,您可以看到它在几乎所有涉及微量样品处理的实验步骤中都是不可或缺的工具。养成良好的操作习惯,能极大延长仪器寿命并保证实验结果的重复性。