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伯乐S1000梯度PCR仪需要使用哪些耗材和试剂?
2025-12-16 09:11:43 作者: 高思维医疗 598

伯乐(Bio-Rad)S1000是一款经典的96孔梯度PCR仪,性能稳定可靠。其耗材和试剂的选择与其他标准PCR仪类似,但有一些品牌特有的推荐和注意事项。以下是使用伯乐S1000梯度PCR仪所需的耗材和试剂清单及选择指南:


一、伯乐S1000梯度PCR仪核心耗材

1、PCR板或管

(1)类型:必须使用0.2 ml规格的PCR板或单管/联管。

(2)与仪器的匹配性:

推荐:伯乐原装或认证的耗材(如硬质96孔PCR板),以确保与热盖压力和导热块的Z佳接触,获得Z准确的温度控制。

通用:大多数市售的标准96孔PCR板(平盖或凸盖)和0.2 ml单管/8联管均可使用。

(3)材质:推荐使用聚丙烯材质,导热性好,耐高温。

封盖:

(4)热盖:如果使用PCR仪的热盖功能,必须使用平盖的PCR板或管。

封板膜:如果不使用热盖,或样本有蒸发风险(如长期循环),需使用透明的光学封板膜进行密封。确保封板膜能耐受高温(通常可至120°C以上)。

2、封板膜(可选)

如上所述,用于密封PCR板。选择粘性好、密封性强、无PCR抑制剂的光学封板膜。


二、伯乐S1000梯度PCR仪核心试剂

1、PCR预混液

(1)常用和Z方便的选择。通常包含:

(2)热启动DNA聚合酶:如Taq酶、高保真酶等。

(3)dNTPs:四种脱氧核苷酸混合物。

(4)反应缓冲液:含Mg²⁺(镁离子浓度可能可调)。

(5)优化剂和稳定剂。

2、品牌:可选择伯乐自家的SsoAdvanced系列、iTaq系列等预混液,也可以使用其他品牌(如NEB、Takara、Thermo Fisher等)的预混液,需确保其反应体系与程序兼容。

3、自配PCR反应体系

如果您习惯于自行配制,需要准备以下独立组分:

(1)PCR缓冲液(10X或5X):提供合适的pH和盐离子环境。

(2)MgCl溶液:镁离子浓度对PCR特异性影响重大,梯度PCR仪特别适合优化此条件。

(3)dNTP Mix。

(4)正向引物和反向引物。

(5)DNA模板。

(6)DNA聚合酶。

(7)无菌去离子水。

4、阳性对照与阴性对照

(1)阳性对照:含有已知目标序列的DNA模板,用于验证整个反应体系正常。

(2)阴性对照(无模板对照,NTC):用等体积水替代DNA模板,用于检测试剂或环境是否存在污染。


三、伯乐S1000梯度PCR仪辅助耗材与试剂

1、移液器及无菌吸头:用于精确分装试剂,需保证无核酸酶污染。

2、离心机:用于在将板/管放入PCR仪前,离心混匀并收集管壁液滴。

3、冰盒:在配制反应体系时保持试剂低温,防止非特异性扩增。

4、无核酸酶水:用于稀释或调整反应体积。

5、样品板/管架:方便操作。


四、伯乐S1000梯度PCR仪选择建议总结

1、追求性能和兼容性:选择伯乐原装的0.2 ml硬质PCR板和其推荐的预混液。

2、常规使用,控制成本:选择市面上可靠品牌的平盖0.2 ml PCR板和性能稳定的预混液(需经过验证)。

3、进行梯度优化实验:

务必使用成分均一的主混合液。

实验设计时,在板上合理安排不同温度或条件的样本位置。

Z后建议:

阅读 《伯乐S1000用户手册》,其中会有官网推荐的耗材型号和详细的实验设置指南。

在开始重要的梯度优化实验前,先用已知模板和引物进行常规PCR测试,以确认整个系统(仪器+耗材+试剂)工作正常。

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