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2025-12-16 09:11:43
作者: 高思维医疗
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伯乐(Bio-Rad)S1000是一款经典的96孔梯度PCR仪,性能稳定可靠。其耗材和试剂的选择与其他标准PCR仪类似,但有一些品牌特有的推荐和注意事项。以下是使用伯乐S1000梯度PCR仪所需的耗材和试剂清单及选择指南:
一、伯乐S1000梯度PCR仪核心耗材
1、PCR板或管
(1)类型:必须使用0.2 ml规格的PCR板或单管/联管。
(2)与仪器的匹配性:
推荐:伯乐原装或认证的耗材(如硬质96孔PCR板),以确保与热盖压力和导热块的Z佳接触,获得Z准确的温度控制。
通用:大多数市售的标准96孔PCR板(平盖或凸盖)和0.2 ml单管/8联管均可使用。
(3)材质:推荐使用聚丙烯材质,导热性好,耐高温。
封盖:
(4)热盖:如果使用PCR仪的热盖功能,必须使用平盖的PCR板或管。
封板膜:如果不使用热盖,或样本有蒸发风险(如长期循环),需使用透明的光学封板膜进行密封。确保封板膜能耐受高温(通常可至120°C以上)。
2、封板膜(可选)
如上所述,用于密封PCR板。选择粘性好、密封性强、无PCR抑制剂的光学封板膜。
二、伯乐S1000梯度PCR仪核心试剂
1、PCR预混液
(1)常用和Z方便的选择。通常包含:
(2)热启动DNA聚合酶:如Taq酶、高保真酶等。
(3)dNTPs:四种脱氧核苷酸混合物。
(4)反应缓冲液:含Mg²⁺(镁离子浓度可能可调)。
(5)优化剂和稳定剂。
2、品牌:可选择伯乐自家的SsoAdvanced系列、iTaq系列等预混液,也可以使用其他品牌(如NEB、Takara、Thermo Fisher等)的预混液,需确保其反应体系与程序兼容。
3、自配PCR反应体系
如果您习惯于自行配制,需要准备以下独立组分:
(1)PCR缓冲液(10X或5X):提供合适的pH和盐离子环境。
(2)MgCl溶液:镁离子浓度对PCR特异性影响重大,梯度PCR仪特别适合优化此条件。
(3)dNTP Mix。
(4)正向引物和反向引物。
(5)DNA模板。
(6)DNA聚合酶。
(7)无菌去离子水。
4、阳性对照与阴性对照
(1)阳性对照:含有已知目标序列的DNA模板,用于验证整个反应体系正常。
(2)阴性对照(无模板对照,NTC):用等体积水替代DNA模板,用于检测试剂或环境是否存在污染。
三、伯乐S1000梯度PCR仪辅助耗材与试剂
1、移液器及无菌吸头:用于精确分装试剂,需保证无核酸酶污染。
2、离心机:用于在将板/管放入PCR仪前,离心混匀并收集管壁液滴。
3、冰盒:在配制反应体系时保持试剂低温,防止非特异性扩增。
4、无核酸酶水:用于稀释或调整反应体积。
5、样品板/管架:方便操作。
四、伯乐S1000梯度PCR仪选择建议总结
1、追求性能和兼容性:选择伯乐原装的0.2 ml硬质PCR板和其推荐的预混液。
2、常规使用,控制成本:选择市面上可靠品牌的平盖0.2 ml PCR板和性能稳定的预混液(需经过验证)。
3、进行梯度优化实验:
务必使用成分均一的主混合液。
实验设计时,在板上合理安排不同温度或条件的样本位置。
Z后建议:
阅读 《伯乐S1000用户手册》,其中会有官网推荐的耗材型号和详细的实验设置指南。
在开始重要的梯度优化实验前,先用已知模板和引物进行常规PCR测试,以确认整个系统(仪器+耗材+试剂)工作正常。