这是一份详细、专业的 Mini Trans-Blot® 小型转印槽技术参数及使用说明书。本说明书综合了通用操作流程、关键参数和注意事项，适用于这类标准垂直槽式湿转印系统。

一、伯乐Mini Trans-Blot® 小型转印槽产品概述

Mini Trans-Blot® 小型转印槽是一种用于 Western Blot（蛋白质免疫印迹）实验的垂直槽式湿法转印装置。其核心功能是在电场作用下，将经过SDS-PAGE凝胶电泳分离的蛋白质，从凝胶上原位、定向地转印到固相支持膜（如PVDF膜或硝酸纤维素膜）上，以进行后续的免疫检测。

二、伯乐Mini Trans-Blot® 小型转印槽技术参数

凝胶容量：2块

凝胶尺寸：10 x 7.5

推荐电源：PowerPacBasic或PowerPac Hc

应用：Western杂交、核酸转印

尺寸：12 x 16 x 18 cm

重量：0.75 kg

缓冲液：450 ml

效率：1小时内转印2块10x7.5cm凝胶

转印凝胶夹：2个可夹10 x 7.5 cm 凝胶

高质量：转印小型凝胶

型号：1703935、1703930

三、系统组件清单

1、转印槽主体：带电极和盖子的透明槽体。

2、凝胶夹板（“三明治”夹）：一对黑色和透明的塑料夹板，用于固定转印“三明治”。

3、海绵垫：至少两块，用于提供均匀压力和支持。

4、滤纸垫片：至少两张，尺寸略大于凝胶和膜。

5、冰盒（冷却芯）（可选配件）：插入槽内，用于在转印时降温。

6、电源导线：红色（正极，阳极）和黑色（负极，阴极）。

四、操作步骤（湿转印法）

A、转印前准备

1、配制缓冲液：根据实验要求配制足够的转印缓冲液（如Tris-甘氨酸缓冲液、Towbin缓冲液等），并预冷至4°C。

2、制备膜和滤纸：将PVDF膜在甲醇中浸泡15秒活化，然后与滤纸、海绵垫一同放入转印缓冲液中平衡至少15分钟。

3、制备凝胶：电泳结束后，小心撬开玻璃板，切去浓缩胶和多余部分，将目的蛋白所在的分离胶放入转印缓冲液中平衡。

B、组装“三明治”

关键原则：始终在盛有缓冲液的托盘中进行，防止夹入气泡。

1、将凝胶夹板的透明面（阴极侧，对应负极）向下打开。

2、依次在夹板上放置：

海绵垫

滤纸

凝胶（正面朝下）

膜（精确对齐覆盖凝胶，避免移动）

滤纸

海绵垫

3、小心地合上黑色夹板（阳极侧，对应正极），确保各层对齐、无气泡。听到“咔哒”声表示夹紧。

4、将组装好的凝胶夹板插入转印槽的卡槽中，确保黑色夹板面对红色正极（阳极），透明夹板面对黑色负极（阴极）。即：凝胶在负极侧，膜在正极侧（蛋白质带负电，向正极移动）。

C、进行转印

1、将转印槽置于冰水浴中，或连接好外接循环冷却水系统。

2、向槽内灌满预冷的转印缓冲液，确保浸没凝胶夹板。

3、盖上槽盖，连接电源：红线接红端（阳极），黑线接黑端（阴极）。

4、设置电源参数：

恒压法（常用）：设定 100V，转印60-90分钟（分子量标准）。

恒流法：设定 250-300 mA，转印60-90分钟。

高分子量蛋白：可采用 30V 恒压过夜转印。

5、启动电源，开始转印。过程中会产生热量，必须确保有效的冷却。

D、转印后处理

1、转印结束后，关闭电源，断开导线。

2、取出凝胶夹板，拆开，用镊子小心取出膜。

3、用丽春红S染液或立春红染膜液快速染色，检查转印效率。也可直接进行后续的封闭和免疫杂交步骤。

五、维护与保养

1、每次使用后，用去离子水清洗所有部件（槽体、夹板、海绵、冰盒等），晾干后保存。

2、避免刮擦电极（铂金丝），切勿用硬物接触。

3、定期检查电极是否腐蚀或断裂。

4、海绵和滤纸为消耗品，多次使用后若变形或破损应及时更换，以保证压力均匀。

5、长期不用时，将所有部件干燥存放于清洁处。