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2026-01-15 09:29:28
作者: 高思维医疗
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伯乐(Bio-Rad)Trans-Blot® SD 半干转印系统的详细技术参数与使用说明书。该系统是经典的半干式电转印仪,以其结构简单、缓冲液用量少、转印速度快而广泛应用于蛋白质印迹实验中。
一、伯乐Trans-Blot® SD 半干转印系统1703940产品概述
Trans-Blot® SD 半干转印系统是一种经济高效的半干式电转印设备。它利用预先被转印缓冲液浸润的滤纸堆叠成“三明治”结构,在凝胶和膜之间建立直接的电接触。与湿转相比,该系统仅需少量缓冲液,并能在15-60分钟内完成大部分蛋白的转印。
二、伯乐Trans-Blot® SD 半干转印系统1703940技术参数
型号:Trans-Blot® SD Semi-Dry Transfer Cell
MAX 转印面积:16 x 18 cm (可容纳一块标准中型胶或两块迷你胶并排)。
电极板:坚固的铂金涂层阳极板和不锈钢阴极板,确保电场均匀分布。
电源兼容性:需外接一台恒压/恒流/恒功率电源(如Bio-Rad PowerPac™系列)。
推荐电源设置:恒流模式:通常为 0.8 - 2.5 mA/cm² 凝胶面积。
恒压模式:通常为 10 - 25 V。
转印时间:15 - 60 分钟(具体取决于蛋白分子量、凝胶厚度和缓冲体系)。
缓冲液需求:每次转印仅需 100 - 200 mL 缓冲液(浸润6-12张滤纸),用量远少于湿转系统。
外形尺寸(转印槽):约 25 cm (长) x 20 cm (宽) x 10 cm (高) (不含电极线)。
重量:约 2.5 kg。
安全特性:带安全联锁盖的透明上盖,操作时可自动断电。
三、伯乐Trans-Blot® SD 半干转印系统系统组件清单
1、主转印槽:包含阳极铂金板。
2、透明安全上盖:包含阴极不锈钢板及电极插头。
3、专用滤纸框架(可选/早期型号):用于固定滤纸,便于操作。
4、使用手册。
四、伯乐1703940转印系统操作步骤(标准流程)
A、转印前准备:
1、配制缓冲液:根据目标蛋白特性选择合适的半干转印缓冲液(如:Towbin缓冲液、CAPS缓冲液等)。
2、制备“三明治”组件:
(1)裁剪6张与凝胶尺寸相同的厚滤纸(如Whatman 3MM)。
(2)裁剪 1张 PVDF膜或NC膜。PVDF膜需预先在甲醇中活化1-2分钟,然后与滤纸一同在转印缓冲液中平衡。
(3)完成电泳的SDS-PAGE凝胶在转印缓冲液中平衡5-10分钟。
3、组装“三明治”(在盛有缓冲液的浅盘中操作,防止干燥):
(1)顺序为:阳极板(+) → 3张浸润滤纸 → 转印膜 → 凝胶 → 3张浸润滤纸 → 阴极板(-)。
(2)关键:确保各层间无气泡。可用玻璃管或 roller 在每铺一层后仔细滚压以赶走气泡。
B、系统组装与运行:
1、将组装好的“三明治”对齐放置于阳极板上。
2、盖上安全上盖,确保锁紧。
3、将上盖的电极插头与外部电源的对应插座(阴极黑色,阳极红色)连接。
4、设置电源参数(示例):
(1)恒流模式:对于一块标准迷你胶(~8x10 cm),设置电流为 150 - 200 mA,时间 30 分钟。
(2)恒压模式:设置电压为 15 - 20 V,时间 30 - 45 分钟。
(3)注意:总电流不应超过电源和系统的承受能力。
5、启动电源,开始转印。过程中会产生热量,系统无需额外冷却,但环境温度不宜过高。
C、转印后处理:
1、转印结束后,关闭电源,打开上盖。
2、小心取出膜,根据后续检测方法进行染色(如丽春红S)或封闭。
五、应用指南与优化建议
1、高分子量蛋白(>100 kDa):建议降低电流/电压,延长转印时间(如0.8 mA/cm2, 60分钟),或使用含有SDS的转印缓冲液。
2、低分子量蛋白(<20 kDa):可适当缩短时间,防止过转。
3、双胶转印:可在中间额外增加一层膜,用于捕获穿透一层膜的蛋白。
4、缓冲液选择:
(1)通用型:Tris/Glycine 缓冲液(含甲醇)。
(2)碱性蛋白/高通量:CAPS缓冲液(pH 10-11),适用于后续测序。
(3)膜蛋白/高分子量蛋白:可添加终浓度0.01-0.1%的SDS。
六、维护与保养
1、每次使用后,用去离子水清洁电极板,并用软布擦干,防止缓冲液盐分腐蚀。
2、定期检查电极板是否有划痕或涂层脱落。
3、存放于干燥清洁处。
总结:Trans-Blot SD 半干转印系统是一款可靠、经济的转印工具,特别适合常规Western Blot实验。其成功的关键在于精确的“三明治”组装和优化的电转参数。对于追求更高通量、更快速和标准化流程的用户,可考虑其升级产品TransBlot? Turbo 系统。