这是一份详细、通用且注重安全的凝胶成像系统操作规程。请在操作前阅读您所用型号的特定说明书，本规程可作为通用指南和实验室标准操作程序的模板。

一、凝胶成像系统标准操作规程

1、目的

规范凝胶成像系统的使用操作，确保设备正常运行，获得高质量成像数据，并保障操作人员安全。

2、适用范围

适用于本实验室使用的 [请填写设备型号，例如：Bio-Rad ChemiDoc MP] 凝胶成像系统，用于对DNA/RNA琼脂糖凝胶、蛋白质SDS-PAGE凝胶、蛋白印迹膜等进行图像采集。

3、安全注意事项

（1）紫外线危害：使用紫外光源时，必须始终关闭样品舱门。紫外线会对眼睛和皮肤造成严重伤害。

（2）个人防护：操作含有溴化乙锭等核酸染料的凝胶时，需佩戴实验手套，避免直接接触。处理完凝胶后，按实验室规定丢弃到指定容器。

（3）电气安全：勿用湿手操作。保持仪器及电脑周围干燥、清洁。

（4）样品放置：确认样品台/样品架清洁干燥，避免液体渗入仪器内部。

（5）光源寿命：为延长高强度光源（如白光、激光）寿命，成像结束后应及时关闭光源或退出成像软件。

4、操作前准备

（1）仪器状态：打开电脑，启动凝胶成像系统主机电源，系统自检（指示灯闪烁）。

（2）软件启动：双击桌面上的成像软件图标（如Image Lab， GelDoc Go等），等待软件与设备连接就绪。

（3）样品准备：

凝胶/膜：从电泳槽中取出，用去离子水或相应缓冲液稍作冲洗，去除表面盐分和气泡。

放置：将凝胶或膜平铺在样品台的中心位置。对于透射成像，确保凝胶位于透射板中心。

方向标记：建议在凝胶左下角或右下角做一个方向标记（如切角），以便后期识别图像方向。

（4）选择成像板/模式：

透射模式：用于常规核酸琼脂糖凝胶（如EB染色）。将凝胶放在透射板上。

反射模式：用于考马斯亮蓝、银染的蛋白凝胶或湿态的印迹膜。

荧光/化学发光模式：用于SYBR系列染料、荧光标记抗体或化学发光检测。通常需要选择相应波长的激发/发射滤光片组合，并在暗室环境下操作（关闭样品舱门）。

二、凝胶成像系统标准操作流程

A、步骤一：放置样品与关闭舱门

1、轻轻打开样品舱门。

2、将准备好的样品放置在样品台中心。

3、确认样品放置平整，无气泡或褶皱。

4、平稳关闭样品舱门。

B、步骤二：设置成像参数（以软件控制为例）

1、在软件界面选择正确的应用类型（如“凝胶电泳”、“荧光”、“化学发光”）。

2、选择相应的光源和滤光片（如果需要）：

白光（反射）：用于染色凝胶拍照。

白光（透射）：用于EB染色的核酸凝胶。

紫外（302nm或365nm）：用于EB、GelRed等染料。（警告：此时舱门必须关闭！）

特定蓝光/绿光激发：用于SYBR Safe、SYPRO Ruby等荧光染料。

3、设置曝光时间：

可先使用自动曝光功能，让软件推荐一个合适时间。

若自动曝光不理想，切换为手动模式，进行增减调整。目标：条带清晰，背景不过曝（无白色饱和区域）。

4、调整焦距与对焦：

使用软件中的“对焦”功能或手动调节镜头高度（部分型号），使图像在预览窗口中清晰。

对于薄胶，可能需要使用自动对焦功能。

（可选）使用光圈或图像平均功能减少噪点（尤其适用于低亮度荧光或化学发光）。

三、凝胶成像系统预览、拍摄与保存

1、点击“预览/实时显示”按钮，查看参数设置效果。

2、微调曝光时间、对焦等参数，直至满意。

3、点击“拍摄/捕获”按钮，采集Z终图像。

4、图像保存：

立即将图像保存到指定文件夹（建议命名规则：日期_实验者_样品名称_条件）。

保存为无损或高分辨率格式（如.tif， .png），用于后续分析。

同时可保存一份.jpeg格式用于快速查看或插入报告。

5、数据记录：在实验记录本上记录成像参数（曝光时间、光圈、滤光片等）。

四、凝胶成像系统结束工作

1、从样品舱中小心取出样品，妥善处理。

2、用柔软的湿布或酒精棉片清洁样品台和透射板，确保无残留染料或污渍。

3、在软件中关闭图像，退出成像程序。

4、关闭凝胶成像系统主机电源。

5、关闭电脑，整理工作台。

五、日常维护

1、每次使用后清洁样品台。

2、定期用镜头纸和气吹清洁相机镜头（频率根据使用环境而定，通常每季度一次）。

3、避免在仪器上放置重物或洒落液体。

4、长期不使用时，应拔掉电源，并用防尘罩盖好。

六、常见问题处理

1、图像模糊：重新对焦；检查镜头或样品台是否有水汽/污物。

2、背景不均匀/有污点：清洁样品台和透射板。

3、信号太弱/太强：调整曝光时间；检查光源是否正常；确认是否选择了正确的滤光片。

4、软件无法连接设备：检查所有连接线缆；重启电脑和设备。

5、遇到无法解决的故障：立即停止操作，报告实验室负责人或联系设备工程师，并挂上“待维修”标识。