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2026-02-05 10:14:41
作者: 高思维医疗
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艾本德(Eppendorf)电动移液器的校准是一项需要严格按照规范操作的精密工作。建议由经过培训的专业人员或在厂家工程师指导下进行。在校准前,请务必详细阅读您移液器型号的官网用户手册,因为不同型号(如 Eppendorf Xplorer / Research plus 电动型、Eppendorf E3/E4 等)的操作细节可能略有不同。
以下提供一套适用于大多数艾本德电动移液器的通用校准步骤流程,它基于标准的质量测定法(也称“称重法”)。
一、艾本德电动移液器校准原则与准备
1、校准环境:在无风、稳定的台面进行,环境温度稳定在20-25°C为佳(温度波动<0.5°C/h),相对湿度50%以上(防止蒸发过快)。
2、设备与试剂:
(1)待校准的艾本德电动移液器
(2)经过计量认证的分析天平(精度至少为移液器Z小分度值对应质量的0.1%,如校准10μl量程,需精度达0.001g的百万分之一天平)
(3)经认证的温度计和湿度计
(4)校准用纯水:高纯度去离子水(电阻率≥10 MΩ·cm),提前与水、移液器、吸头、天平在同一环境下平衡至少2小时。
(5)匹配的、高质量的吸头:推荐使用Eppendorf原装吸头。
(6)称量容器(如小烧杯)。
3、安全:遵守实验室安全规范。
二、艾本德电动移液器标准校准流程
整个流程可概括为:测试当前性能 → 判断是否合格 → 如不合格则进行内部校准(Adjustment) → 再次验证。
A、性能测试
1、设置目标体积:在移液器上设置需要校准的体积点。通常至少选择三个点:量程上限(100%)、中间点(约50%)和量程下限(10%或Z小量程)。例如,对于100-1000μl的移液器,可选择1000μl、500μl和100μl。
2、准备天平与记录表:打开天平,调零。准备好记录表,记录环境温度、湿度、水的密度等。
3、预润湿:装上吸头,吸取并排空校准用水3-5次,使吸头内壁形成稳定的液膜,减少误差。
4、重操作:
(1)将称量容器放在天平上,去皮归零。
(2)使用移液器小心吸取目标体积的纯水。
(3)以推荐的移液模式(通常为“常规模式”)将水排入称量容器。
(4)注意排液技巧:对于大部分移液器,应将吸头顶部靠在容器内壁,缓慢、稳定地按下排液键到底,停留一秒后,沿壁滑出。
(5)记录天平显示的稳定读数(质量m,单位g)。
5、重复测量:对每个体积点重复测量10次。每次更换新吸头,并重复预润湿步骤。
6、与标准比较:
将计算出的系统误差和随机误差,与移液器商家声明的允许误差限进行比较。艾本德的允许误差通常遵循ISO 8655或自定更严格的标准。
B、判断与决策
1、如果两项误差均在允许范围内 → 移液器性能合格,无需调整,出具校准报告即可。
2、如果任一项误差超出允许范围 → 移液器需要内部校准(即调整其内部参数)。
C、内部校准
这是制造商对“校准”的专业定义,用户通常称之为“校正”或“调校”。必须在性能测试不合格后进行。
通用流程如下:
1、进入校准模式:
通常需要关机,然后按住特定按键(如“排液键”或“ eject键”)的同时开机,或通过菜单(Settings -> Service -> Calibration)进入。请务必查阅手册!
2、选择校准体积点:系统通常会提示你校准几个关键点(如大、小体积)。
3、执行校准:
(1)系统会提示你“吸取”一个参考值(可能是空气,或要求你连接一个校准工具模拟负载)。
(2)对于需要真实体积校准的型号,你需要使用一把已校准好的、精度更高的参考移液器,或者按照屏幕提示,使用刚才称重法测得的实际平均值作为输入。
(3)根据移液器提示,输入目标值(即你希望移液器达到的精确体积)。
(4)移液器内部电机会自动调整其活塞行程的步进数,从而改变吸取体积。
4、保存并退出:完成所有点的调整后,保存新参数,退出校准模式。
D、校准后验证
完成内部校准后,必须重新执行一步“性能测试”的全部流程,以验证调整后的移液器误差是否已回到允许范围内。
E、文件化
记录所有数据、环境条件、操作人员、日期,并贴上清晰的校准状态标签(注明下次校准日期)。
三、重要建议
1、专业服务:对于实验室质量控制(GLP/GMP)或关键应用,建议将移液器送至艾本德的计量服务中心或具备资质的第三方机构进行校准。他们有更专业的设备、环境和认证流程。
2、定期进行:根据使用频率,通常每6-12个月应进行一次校准。日常使用中应每月进行快速的功能检查。
3、软件辅助:使用艾本德官网的移液器校准/管理软件(如“Eppendorf Pipette Calibration”),可以极大简化Z值计算、数据记录和报告生成。